溶酶體染色技術(shù)

溶酶體，細(xì)胞內(nèi)的“消化工廠”，富含眾多酸性水解酶，如酸性蛋白酶和酸性磷酸酶等，這些酶對蛋白質(zhì)、核酸和多糖等物質(zhì)具有顯著的水解作用，在溶酶體染色過程中，酸性染料被應(yīng)用于染色，這些染料與溶酶體內(nèi)的酸性水解酶結(jié)合，形成沉淀物，從而使溶酶體呈現(xiàn)出鮮明的紅色。

為了解決染色過程中的挑戰(zhàn)，Abbkine公司推出了TraKine Pro系列溶酶體特異性熒光染色試劑盒——Live-cell Lysosome Staining kit，產(chǎn)品編號為KTC4200，該試劑盒適用于多種顯微鏡，包括常規(guī)熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、STED、SIM、PALM、STORM與TIRF等，能夠提供高特異性和低背景的染色效果。

溶酶體熒光探針對死細(xì)胞同樣具有染色能力，Lyso-Tracker&Red作為一種溶酶體紅色熒光探針，能夠穿透細(xì)胞膜，實現(xiàn)活細(xì)胞溶酶體特異性熒光染色，溶酶體熒光探針對死細(xì)胞同樣適用。

AO染色劑能夠穿透完整的細(xì)胞膜，嵌入所有細(xì)胞（包括活細(xì)胞和死細(xì)胞）的細(xì)胞核，呈現(xiàn)出綠色熒光，值得注意的是，溶酶體是細(xì)胞內(nèi)具有單層膜囊狀結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，而細(xì)胞核則是細(xì)胞中最大、最重要的細(xì)胞器。

在實驗中，我們探討了陽離子材料在溶酶體逃逸實驗中的應(yīng)用，實驗結(jié)果顯示，在6小時時，溶酶體染色突然變暗，這可能是因為引入的DCA材料破壞了溶酶體，實現(xiàn)了逃逸，導(dǎo)致染色變淡，這與未引入DCA的B組染色結(jié)果形成鮮明對比，理論上在6小時時染色不應(yīng)更深。

在高倍顯微鏡下，線粒體也需要通過健那綠染色才能觀察到，通過染色，我們可以在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布，從而使活細(xì)胞的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色。