HPLC中的加樣回收率試驗(yàn)怎么做呢？探討多種方法

在進(jìn)行HPLC分析時(shí)，加樣回收率試驗(yàn)是一項(xiàng)重要的驗(yàn)證手段，具體操作如下：取兩份相同的樣品，其中一份加入已知量的待測(cè)成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，兩份樣品按照相同的分析步驟進(jìn)行處理，通過(guò)比較加標(biāo)樣品的測(cè)定結(jié)果與未加標(biāo)樣品的測(cè)定結(jié)果，計(jì)算二者的差值與加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的理論值之比，從而得到樣品的加標(biāo)回收率。

針對(duì)問(wèn)題一：方法學(xué)驗(yàn)證中是否必須進(jìn)行加樣回收率實(shí)驗(yàn)？答案通常是肯定的，實(shí)驗(yàn)時(shí)，可以以自身對(duì)照溶液的濃度為基準(zhǔn)，向兩側(cè)逐漸調(diào)整濃度。

通常的實(shí)驗(yàn)步驟包括：按照實(shí)驗(yàn)要求，準(zhǔn)備所需的試劑和設(shè)備，并確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔與整潔，將待測(cè)物質(zhì)準(zhǔn)確加入反應(yīng)體系中，并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行相應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)或物理過(guò)程。

加標(biāo)回收率怎么做

1、加標(biāo)回收率的計(jì)算公式為：加標(biāo)回收率 =（加標(biāo)試樣測(cè)定值 - 試樣測(cè)定值）÷ 加標(biāo)量 × 100%。

2、利用濃度值計(jì)算加標(biāo)回收率的公式可以表示為：P =（c2 - c1）/ c3 × 100%（其中V1 = V2條件下）。

3、加標(biāo)回收率的理論公式應(yīng)用前提：使用該公式時(shí)，需要滿足以下兩個(gè)條件：①同一樣品的子樣取樣體積必須相等；②各類(lèi)子樣的測(cè)定過(guò)程必須嚴(yán)格遵循相同的操作步驟。

回收率試驗(yàn)怎么做

1、回收率的常見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)通常在95%至100.5%之間，針對(duì)問(wèn)題二：方法學(xué)驗(yàn)證中是否必須進(jìn)行加樣回收率實(shí)驗(yàn)？這是為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，通常以自身對(duì)照溶液的濃度為中間值，向兩側(cè)逐漸調(diào)整。

2、進(jìn)行加樣回收試驗(yàn)時(shí)，首先將標(biāo)準(zhǔn)溶液分別加入一系列已知體積的容器中，這些容器被稱為加樣瓶，確保每個(gè)容器中加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液量相等。

3、在回收率試驗(yàn)中，需要向空白輔料中加入定量的維生素B12原料藥，通過(guò)對(duì)比測(cè)定值與實(shí)際加入量來(lái)計(jì)算回收率，具體操作包括：向空白輔料中加入小于、等于和大于片劑標(biāo)示量的維生素B12原料藥各三組，共九個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)試。

4、采用擦拭法進(jìn)行回收率測(cè)定時(shí)，將一定量的產(chǎn)品均勻涂抹在模擬的一定面積的某種材料表面（如不銹鋼、玻璃、塑料），待干燥后，使用棉簽取樣法進(jìn)行取樣，并通過(guò)適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行萃取，使用TLC或HPLC方法進(jìn)行測(cè)定和比較。

5、在大多數(shù)情況下，加入的物質(zhì)b與待測(cè)物質(zhì)a是同一種物質(zhì)，加入b物質(zhì)后測(cè)得的結(jié)果應(yīng)該正好比未加b物質(zhì)時(shí)多出b的量，如果回收率為50%，則加b物質(zhì)與未加b物質(zhì)相比，僅多出b量的一半。